Corso di Laurea in Tecniche di Laboratorio Biomedico - Cuneo

Fornire le conoscenze fondamentali sulle basi genetiche ed i meccanismi molecolari di sviluppo delle patologie umane attraverso lo studio della trasmissione dei caratteri e l’analisi delle mutazioni geniche e cromosomiche. Fornire i modelli di ereditarietà dei caratteri mendeliani ed i metodi per l’identificazione di geni e mutazioni patologiche nell’uomo. Fornire gli elementi di base della consulenza genetica e della diagnosi prenatale. Fornire le basi  della citogenetica costituzionale per la diagnosi e prevenzione delle malattie nell’ambito post-natale,  pre-natale e oncologico. Fornire allo studente le tecniche di tipizzazione tissutale HLA necessarie per determinare la compatibilità donatore/ricevente nei trapianti.

Lo studente dovrà:

• aver acquisito  le conoscenze fondamentali sulle basi genetiche ed i meccanismi molecolari di sviluppo delle patologie umane attraverso lo studio della trasmissione dei caratteri e l’analisi delle mutazioni geniche e cromosomiche;
• aver acquisito le basi fondamentali della citogenetica costituzionale e molecolare;
• aver acquisito le principali nozioni  dell’Immunogenetica: la compatibilità dei trapianti e la tipizzazione tessutale HLA;
• aver acquisito la capacità di utilizzare le metodologie molecolari nell’ambito delle malattie genetiche e dei tumori.

Tecnologia DNA Ricombinante: 12 ore di lezione (1 CFU)

• Gli acidi nucleici: DNA e RNA. Cenni sulla trascrizione e sulla traduzione. Metodiche di estrazione. Utilizzo del DNA e dell’RNA nei saggi di ibridazione: Southern e Northern blotting, marcatura terminale del DNA: oligonucleotidi.
• .La Polymerase Chain Reaction (PCR): che cosa è, i parametri che si possono ottimizzare, come si disegnano i primer. Applicazioni della PCR: ricerca di mutazioni puntiformi note: metodi diagnostici.
• Applicazioni della PCR: ricerca di mutazioni puntiformi sconosciute: metodi di screening. Alcuni cenni sulla metodica di sequenziamento. La RT-PCR nell’individuazione delle traslocazioni cromosomiche.
• Cenni su nuove tecniche: Real Time PCR, microarrays applicati sia agli acidi nucleici che alle proteine.
• Metodiche di clonaggio del DNA : cenni sull’identificazione di geni possibili causa di malattia.
• I microsatelliti del DNA: analisi su PAGE e con elettroforesi capillare. Applicazioni nel campo forense e nella ricerca del chimerismo post trapianto di midollo. Analisi di linkage.
• Cenni su nuove tecniche: terapia genica e alcune sue applicazioni.

Genetica Medica: 12 ore di lezione (1 CFU)

• Definizione, finalità Geni, organizzazione del genoma umano e malattie genetiche
• Tipi di mutazione e loro effetti biologici (dalla variabilità alla patologia: perdita/guadagno di funzione, dominanza negativa)
• Costruzione degli alberi genealogici
• Trasmissione dei caratteri monofattoriali ed esempi di malattie genetiche: autosomiche dominanti (sindrome di Marfan, ipercolesterolemia familiare, nanismo acondroplasico, corea di Hungtington), autosomiche recessive (fibrosi cistica, emoglobinopatie), legate al cromosoma X, Mary Lyon e inattivazione del cromosoma X (Emofilia, distrofia muscolare di Duchenne), malattie ereditarie da espansione di triplette (Sindrome dell’X fragile)
• Cenni sulle eccezioni all'ereditarietà mendeliana nell'uomo: manifestazione tardiva del fenotipo; penetranza incompleta; espressività variabile; eterozigosi composta; anticipazione; eterogeneità genetica
• Struttura dei cromosomi e metodi di studio.
• Cariotipo, mutazioni cromosomiche numeriche e strutturali, meccanismi patogenetici e conseguenze.
• Sindrome di Down da non disgiunzione e da traslocazione e principali sindromi da aberrazione cromosomica degli autosomi e dei cromosomi sessuali
• Cenni di eredità poligenica-polifattoriale
• Cenni di eredità mitocondriale: omoplasmia ed eteroplasmia.
• Eredità metrilineare
• Consulenza genetica e diagnosi prenatale

Scienze Tecniche di Medicina di Laboratorio di Citogenetica: 12 ore di lezione (1 CFU)

• Citogenetica costituzionale post-natale
• Citogenetica costituzionale pre-natale
• Citogenetica costituzionale mutazionale
• Citogenetica molecolare (FISH)

Scienze Tecniche di Medicina di Laboratorio: Istocompatibilità e Immunogenetica: 24 ore di lezione (2 CFU):

Il Laboratorio di Immunogenetica e di tipizzazione tessutale secondo gli standard EFI

• Le liste di attesa trapianti solidi
• La banca delle cornee e le banche di tessuto
• I registri dei donatori di midollo osseo e di sangue cordonale

Tecniche di tipizzazione tessutale HLA

• Sierologia mediante Citotossicità Complemento dipendente (CDC)
• Tipizzazione molecolare SSO, SSP, Luminex
• Tipizzazione Molecolare mediante sequenza

La ricerca degli anticorpi linfocitotossici con tecniche

a) sierologiche (CDC)

b) ELISA

c) Luminex

L’Insegnamento si articola in quattro moduli:

Tecnologia DNA Ricombinante: prevede 12 ore di lezione (1 CFU) di didattica frontale che si svolgono in aula con l’ausilio di proiezioni

Genetica Medica: prevede 12 ore di lezione (1 CFU) di didattica frontale che si svolgono in aula con l’ausilio di proiezioni

Scienze Tecniche di Medicina di Laboratorio di Citogenetica: prevede 12 ore di lezione (1 CFU) di didattica frontale che si svolgono in aula con l’ausilio di proiezioni

Scienze Tecniche di Medicina di Laboratorio: Istocompatibilità e Immunogenetica: prevede 24 ore di lezione (2 CFU) di didattica frontale che si svolgono in aula con l’ausilio di proiezioni

La verifica dell’apprendimento dell’Insegnamento “Tecniche di diagnosi delle malattie genetiche” avviene con una prova scritta consistente in domande aperte e a risposta multipla, vertenti sull’intero programma dei moduli dell’insegnamento.

L’esame è composto da una prova scritta con n. 30 domande a risposta multipla composte da 5 risposte di cui solo 1 alternativa corretta sul programma svolto durante le ore di lezione.

Il voto finale è espressione di una valutazione collegiale basata sull’esito della prova in trentesimi.