- Oggetto:
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Scienze tecniche: patologia molecolare diagnostica
- Oggetto:
Anno accademico 2011/2012
- Docente
- Susanna Orsini (Docente Titolare dell'insegnamento)
- Insegnamento integrato
- Crediti/Valenza
- 1
- Oggetto:
Sommario insegnamento
- Oggetto:
Obiettivi formativi
Introduzione alle tecniche di biologia molecolare ed alcune loro applicazioni in diagnostica- Oggetto:
Programma
CONTENUTI:
1. Introduzione alle tecniche ed agli strumenti utilizzati nella diagnostica molecolare, l’organizzazione del Laboratorio di Biologia Molecolare, caratteristiche della fase preanalitica: tipologia del prelievo, aliquotazione e stoccaggio, separazione di cellule da sangue periferico e sangue midollare, allestimento di pellets a numero noto di cellule.
2. estrazione degli acidi nucleici: (DNA ed RNA), reazione di Retrotrascrizione
3. la PCR:; denaturazione, appaiamento, estensione
4. componenti della PCR: sequenza target, polimerasi, dNTPs, buffer, magnesio, primers
5. termociclatore
6. efficienza reazione di PCR, metodica end point
7. rivelazione, elettroforesi su gel
8. PCR qualitativa, PCR quantitativa Real Time
9. cenni sulla costruzione dei primers e l’utilizzo degli enzimi di restrizione
10. diagnostica molecolare in microbiologia
11. diagnostica molecolare in virologia: HCV RNA, HIV RNA, HBV DNA
12. genotipizzazione HCV.
13. diagnostica molecolare in malattie genetiche
14. diagnostica molecolare in malattie oncoematologiche
15. esercitazione in laboratorio: si potranno visionare alcune fasi di lavoro in un laboratorio di biologia molecolare.Testi consigliati e bibliografia
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- Dispense fornite dal docente
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